Educação

Oriente a fotografia gel. "Top" é a localização dos poços em que foram originalmente adicionados às amostras. "Inferior" é onde as amostras migraram para e mais frequentemente contém a frente de corante que indica a frente de migração das amostras. Tanto a esquerda e para a direita deve conter um "marcador", usado como um guia de peso molecular previsível.

Rotular as amostras para cada pista. Na parte superior, as amostras adicionadas aos poços migraram verticalmente em "faixas". Portanto, todas as barras visíveis em uma coluna vertical veio de uma amostra carregada directamente sobre este. Use a régua e caneta para colocar limites nas pistas, é difícil ver as colunas.



Rotular os tamanhos moleculares das bandas no marcador de pista. Marcadores disponíveis no mercado vêm com uma foto da gama de modelos que esperar juntamente com os pesos moleculares de cada banda. Bandas são as "barras", horizonal escuro que são efectivamente incorporados os géis de proteínas manchadas.

Desenhar linhas horizontais claras que se estendem para fora a partir de cada marcador de fim para a extremidade oposta do gel. Tenha o cuidado de fazer essas linhas paralelas aos poços e a frente de corante. Estas linhas indicam que as proteínas de marcadores de peso molecular indicadas por cada um dos fitas seria localizado em cada corredor. Por exemplo, uma faixa na pista 4, que está localizada logo abaixo da linha se estendia desde o 25 kilodalton marcador banda faixa 4 sugerem que a banda é quase, mas não completamente 25 peso molecular kDa.

Rotular cada faixa em cada pista, com o seu peso molecular estimado. Use os marcadores como um guia, e os valores de estimativa de entre o tamanho dos marcadores.

Sob a fotografia de gel, fazer uma lista de "proteína" para cada pista. Começa por afirmar que é conhecido de cada amostra, como sua origem ou condições. Em seguida, liste o peso molecular estimado de cada banda na pista. As pistas com um grupo indicam que a amostra contém apenas uma única proteína. As pistas com múltiplas bandas de indicar a presença de várias proteínas. Bandas que trabalham com a frente de migração são menores do que o sugerido pelo marcador mais próximo e, provavelmente, não pode ser esperado se não como "menos do que" indica o marcador.

Na proteína, excentricidades conhecido. Um aspecto de "spread" pode indicar que o excesso de proteína estão presentes ou que a viscosidade da amostra afectada a sua migração Se bandas parecem passar por cima da borda da pista, ou são muito grandes em comparação com as outras bandas, em seguida, a concentração desta proteína é provavelmente demasiado elevada e deve ser diluído no futuro electroforese. A tonalidade acinzentada outro lado da pista, mais escura do que a cor de fundo gel, indicando fragmentos de proteínas indistinguíveis.

Determinar a identidade das proteínas em cada pista. Mesmo se isto é feito usando apenas o peso molecular, a fonte de cada pista provavelmente indicam pistas bem. Considere-se que, em certas condições, as proteínas podem manter um dímero ou trímero de associação sobre um gel. Portanto, uma proteína pode ser um gel de três bandas distintas. Mesmo se as proteínas não podem ser identificados, o grau relativo das bandas pode implicar concentrações de proteínas em solução. Quaisquer proteínas curiosos e desconhecidos podem ser isolados directamente a partir do gel original e enviadas para identificação.